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食品中防腐劑和甜味劑的高效液相色譜儀(HPLC)檢測方案

 更新時間:2020-05-06 點擊量:1670

果汁果膠中防腐劑和甜味劑的高效液相色譜儀(HPLC)檢測方案
食品加工工藝和防腐的需要,以及為了改善食品品質(zhì)和色、味、香,在食品生產(chǎn)加工過程中,食品中 通常會加入少量的天然或者化學(xué)合成的物質(zhì)。近幾年,由于食品安全問題層出不窮,人們越來越重視食 品添加劑所帶來的安全隱患。

 

以下是苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的詳細檢測方法。

1、儀器與試劑

1.1 儀器

高效液相色譜儀

Vertex 色譜柱 250mm×4.6mm×5μm; 超聲波水浴振蕩器;

食品粉碎機;

pH 計;

天平:分度值為 0.001 mg。

1.2 試劑

甲醇:色譜純

乙酸銨溶液:稱取 1.54 g 乙酸銨,加水溶解并稀釋至 1000 mL,經(jīng) 0.45μm 微孔濾膜過濾。 亞鐵氰話鉀溶液:稱取 106 g 亞鐵青化鉀[K3Fe(CN)6•3H2O]加水至 1000 mL。

乙酸鋅溶液:稱取 220g 乙酸鋅[Zn(CH3COO)2•2H20]溶于少量水中,加入 30mL 冰乙酸,加水稀釋至l000mL。

氨水(1+1):氨水與水等體積混合。

2、色譜條件

色譜柱:Vertex C18 柱,250mm x 4.6 mm,5μm; 流動相:甲醇+0.02mol/l 乙酸銨溶液(5:95); 流速:1 mL/min;

進樣量:20μL; 檢測波長 230nm。

3、試樣溶液的制備

3.1 含脂肪、蛋白的樣品

稱取約 10g 左右樣品于燒杯中(固體樣品要用攪拌機攪碎),加入約 60ml 蒸餾水,再超聲波水浴振蕩10 分鐘,然后用轉(zhuǎn)移到 100ml 比色管中,并用少量水潤洗干凈燒杯; 加入 5ml 亞鐵氰化價溶液,搖勻,再加入 5 mL 乙酸鋅溶液,搖勻; 根據(jù) PH 計讀數(shù),用氨水調(diào)節(jié) PH 至接近中性;用水定容至 100ml 刻度,搖勻,用三角瓶,濾紙,玻璃棒,漏斗過濾; 吸取濾液約 1.5ml,用微孔濾膜過濾,濾液待上機分析。

3.2 不含脂肪、蛋白的樣品

稱取約 10g 左右樣品于燒杯中(固體樣品要用攪拌機攪碎),加入約 60ml 蒸餾水,再超聲波水浴振蕩10 分鐘,然后轉(zhuǎn)移到 100ml 比色管中,并用少量水潤洗干凈燒杯; 根據(jù) PH 計讀數(shù),用氨水調(diào)節(jié) PH 至接近中性;用水定容至 100ml 刻度,搖勻,用三角瓶,濾紙,玻璃棒,漏斗過濾; 吸取濾液約 1.5ml,用微孔濾膜過濾,濾液待上機分析。

注:1-安賽蜜;2-苯甲酸;3-山梨酸;4-糖精鈉;混合標準溶液色譜圖

4、結(jié)果分析

4.1 儀器精 確度的測定

取濃度為苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜濃度為 10.0ug/ml,平行測定 7 次。

表 1:精 確 度的測定結(jié)果

分析結(jié)果可以得出,每個組分峰面積的相對標準偏差均小于 1%,表明儀器在選定條件下重現(xiàn)性好, *可以滿足分析測定的要求。

4.2 回收率的測定

分析結(jié)果的準確度可以用回收率來衡量?;厥章试浇咏?100%,測得的結(jié)果越接近真值,即準確度越好。 同時平行測定結(jié)果的相對標準偏差可以表明方法的重現(xiàn)性。

取清涼茶、樣品分別進行加標實驗,加入苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜濃度均為 10.00ug/ml 標 準溶液,平行測樣 7 次,進行回收率實驗。測定結(jié)果見表 2。

表 2:清涼茶的加標測定結(jié)果和回收率

從上表可以看出清涼茶的加標測定的回收率:苯甲酸為 98.5%-103.4%,山梨酸為 98.3%-103.1%,糖 精鈉為 97.5%-104.3%,安賽蜜為 98.4%-103.3%。各組分的回收率都接近 ,滿足日常檢測的要求。

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